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上海紀寧實業有限公司 >>> 新聞動態

ELISA實驗的樣本為什么都要進行稀釋工作

點擊次數:797 發布時間:2018-10-22
 

ELISA試劑盒實驗稀釋血清的進程:
先把蛋白稀釋必定的倍數,比如說10倍、20倍稀釋(這樣可以大體判定一個參數),將抗原進行一系列稀釋包被微量反應板,再用必定稀釋度的陽性參看血清和陰性參看血清進行孵育后洗刷,再加酶結合物進行反應,經孵育洗刷后,加底物溶液顯色,中止反應后分別測定O.D值,選擇O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個O.D值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參看血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參看血清和陰性參看血清的O.D值有明顯不同。
ELISA試劑盒很多人都是知道的,那你知道嗎,其實每一份ELISA試劑盒里邊都有著一份說明書,里邊介紹了樣本稀釋的份額。這時候就有很多人就要問了,為什么ELISA實驗的樣本都要進行稀釋作業?
在ELISA試劑盒實驗血清為什么要稀釋?有兩個原因:
1)比賽按捺比較明顯,應稀釋比賽物;
2)以下降非特異性反應,使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。
血清稀釋用一般的PBS即可,可加1%的BSA,能有用下降ELISA本底,當然假設你嫌費事我覺得用生理鹽水代替PBS也不大。不管你是用直接比賽仍是直接比賽,血清的稀釋倍數必定要事前判定,但也不必一點點,你做一個預實驗即可,選擇OD在1.0左右的稀釋倍數,即你的比賽ELISA中陰性孔OD在1.0,這樣作出來的曲線比較靈敏。
 

 
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