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上海紀寧實業有限公司 >>> 技術文獻

選購ELISA試劑盒時的相關參考標準

點擊次數:50 發布時間:2019-06-12

目前,市面上的ELISA試劑盒價格參差不齊,偽劣產品眾多,我們到底該如何選擇呢?以下是上海紀寧生物科技技術員整理的選購ELISA試劑盒時的相關參考標準,希望能夠為新手提供幫助!

一、根據樣本可獲得性來選擇試劑盒
通常而言,商業化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供應商的試劑盒對樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很珍貴或較難獲取,則需要認真考慮試劑盒對樣品用量的要求。如果樣品量少,且要做多因子檢測時更需謹慎。

二,經費預算

說了半天,還是要看經費的預算。沒經費咋搞科研呢?國際公認的知名品牌一般質量可靠,文獻引用多。但國際品牌由于進口和國際運輸等成本較高,因此售價也較高。其實優質國產品牌也是不錯的選擇, 因省去不少物流和報關費用,與國外進口試劑盒相比價格上有比較大的優惠,而且能提供比較靈活的包裝規格, 如48tests小包裝,非常適合中國國情。實驗君可以上丁香通、小木蟲等行業資訊平臺或論壇等了解。

三、根據實驗物種及待檢樣品性質來選擇
不可輕信能提供近萬種試劑盒,覆蓋多物種的供應商。但如果又非要檢測這些物種的指標時,zui好要對待檢物(如有種屬差異性)進行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應數據。對于樣品類型而言,一般的商業化試劑盒都經過血清、血漿和細胞培養上清液的驗證。在選擇試劑盒時,zui好要詳細閱讀說明書,比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容。另外,在某些情形下樣品中會存在干擾因素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細胞培養上清中含胎牛血清等。因此需根據樣品來選擇試劑盒,必要時還要根據樣本來適當優化。或在樣品收集前,zui好先閱讀一些可靠供應商試劑盒的說明書或直接咨詢。如果您的樣品為組織或細胞裂解物,則需要更謹慎的選擇試劑盒。市面上大多數的商業化試劑盒沒有經過多種來源組織樣本的驗證。這需要實驗君能理解不是所有試劑盒所用的抗體對,都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白,還要考慮組織樣品的基質效應(Matrix Effect)等。但如果實驗君要了解組織樣品的制備問題,我們另起一文來總結。

四、認清訂購渠道
不論是國際還是國內品牌,都需要在訂購前先與生產廠商詳細溝通產品細節(比如酶標板是否可拆卸),了解售前售后技術服務能力等。然后咨詢其訂購渠道,比如直接向廠家訂購或通過中國區或省級授權代理商經銷商訂購。謹防偽劣產品,花了錢是小事,實驗數據的可靠性、真實性是大事呀,選擇正規渠道,選擇優質品質!

五、細致比較試劑盒關鍵性技術參數
ELISA試劑盒的關鍵技術參數包括板內差異性、板間差異性、批間差異性、重復性、特異性及交叉反應性、回收率等。如果實驗君經常開展ELISA實驗,建議使用同一廠家的試劑盒,這樣可盡量保證數據的重復性(當然前提是實驗條件的一致性)。對于科研用的定量ELISA試劑盒,不同的生產廠家使用的抗體對、酶以及底物、生產工藝和研發實力不盡相同,自然不同廠家試劑盒測出的數據會有差異。

六、根據樣品中檢測物水平來選擇試劑盒
如果實驗君對于樣品中待檢物的水平沒有任何可參考的數據,zui好選擇寬動力學檢測范圍的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低,建議選擇高靈敏度的試劑盒。為了降低基質效應,有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠超過試劑盒的檢測范圍(標曲范圍), 也需做適當的倍數稀釋。在zui后計算結果時,需乘以相應的稀釋倍數。

七、供應商資質評估
有些供應商可提供數百種常用指標ELISA,然而有些供應商則聲稱可提供數千種甚至上萬種指標的試劑盒,但質量參差不齊,更有濫竽充數禍害科研之輩。那如果選擇供應商呢? 一是從同行或實驗室同僚了解供應商的口碑,售前售后的處理情況。第二查詢供應商詳細了解相關指標,可查詢這些指標是否已經開發出特異性抗體?如果查遍全球連抗體都還不可獲取,又如何開發出ELISA試劑盒呢? 第三文獻引用是王道,尤其是SCI期刊文章對供應商產品的引用。第四了解供應商的研發歷史和品牌史,很多供應商頻頻更換公司名或更換公司注冊地,其中名堂實驗君應該能悟出。不要迷信國外“品牌”,國外“品牌”不代表是國際知名品牌。很多打著國外旗號的公司,其實就是空殼的皮包公司,從全球OEM劣質產品。國外供應商也有售后不給力的時候。

 

 
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