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上海紀寧實業有限公司 >>> 技術文獻

雞ELISA試劑盒試驗注意事項有哪些?

點擊次數:67 發布時間:2019-04-24

 一年有四個時節,每個時節都有不同的風景,而我喜愛冬天下雪時的絢麗風景。冬天,大雪紛飛人們好象來到了一個幽雅恬靜的jing界,來到了一個晶亮透剔的童話般的世界。松的那清香,白雪的那冰香,給人一種涼瑩瑩的撫慰。全部都在過濾,全部都在提高,連我的心靈也在凈化,變得純真而又夸姣。

在ELISA實驗前的注意事項

 1、仔細閱讀闡明書
 2、承認試劑盒在有效期內
 3、按闡明書承認全部試劑徹底(數量、體積)
 4、標本制備要標準,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內無法實驗者,注意低溫保存
 5、準備好全部實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等
 6、依據檢測標本數量承認所需試劑的量
 7、按闡明書將所用試劑平衡至室溫,制造所需試劑
 ELISA實驗時,注意事項如下:
 1.正式實驗時,應別離以陽性對照與陰性對照控制實驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,闡明有非特異性反響,可采用羊血清、兔血清或BSA等關閉。
 2.在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
 (1)固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方式可所以凹孔平板、試管、珠粒等。現在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在運用前均可進行選擇:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反響,查詢其顯色反響是否均一性,據此判明其吸附功用是否杰出。
 (2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有必定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它實驗條件相一起,查詢陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。關于大都蛋白質來說一般為1~10μg/ml。
 

 
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