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上海紀寧實業有限公司 >>> 技術文獻

ELISA試劑盒SCI文章測定法測定抗體

點擊次數:83 發布時間:2019-03-13

ELISA試劑盒SCI文章操作流程:
檢測抗體多用間接型elisa。以純化抗原包被載體,經4℃,以無關蛋白封閉至少2小時以上,加入待測樣品,室溫孵育1小時,洗滌干凈后加酶標抗體,再經室溫孵育、洗滌后,以底物顯色,顯色到一定程度終止反應,在酶標儀上讀結果或以肉眼判斷。
類型:elisa具體方法的類型繁多,試劑的標準化問題還未zui后解決,溫育的時間、溫度、洗滌液的種類及洗滌次數等都是影響測定的因素。但參考以上基本過程,無論怎樣變化,均離不開抗原-抗體反應、酶標抗體的免疫學反應及酶催化作用。
特點:
1、敏感性高,可檢出濃度在ug~mg/ml水平;
2、特異性強;
3、重復性好;
4、快速、簡便、廉價。
實驗條件
固相載體:可作為固相載體的物質很多,如:纖維素、聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、聚丙烯、交聯葡聚糖、玻璃、硅橡膠、瓊脂糖凝膠等。可以各種形式出現;試管、微量反應板凹孔、小珠.....。zui常用的是聚苯乙烯制品,其吸附性zui好。固相包被的機制一般不外乎物理吸附和共價交聯,
封閉:以無關蛋白占據載體上未被包被的空隙,常用的封閉液是1%牛血清白蛋白或10%小牛血清。
待測樣品:稀釋度要合適,濃度太大會發生非特異性吸附造成假陽性,過分稀釋會影響抗原-抗體之間的免疫學反應。選擇zui適稀釋度,在實驗體系中取光密度在1.0左右的稀釋度為宜。
酶結合物:使用高質量的酶結合物是elisa成功的關鍵。
ELISA試劑盒SCI文章注意事項
酶聯免疫技術的試劑標準化問題尚未完全解決,溫育過程的時間、溫度、洗滌液的種類及洗滌次數都是影響zui后測定的因素。為使實驗得到滿意的結果,在操作過程中應作到
1、每次試驗都必須設陽性和陰性對照。
2、封閉要完全。
3、洗滌要測定。
山柰酚    含量測定    20mg    110861-200808
山柰素    含量測定    20mg    110861-200808
銀杏內酯C(暫行)    含量測定    20mg    110864-200505
銀杏葉對照提取物    鑒別    700mg    110866-200803
三七總皂苷    含量測定    100mg    110870-200001
三七莖葉皂苷    鑒別    50mg    110871-200201
精氨酸    鑒別    100mg    110872-
丙氨酸    鑒別    100mg    110873-9802
纈氨酸    鑒別    100mg    110874-200203
ELISA試劑盒SCI文章

 
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