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上海紀寧實業有限公司 >>> 技術文獻

ELISA試劑盒物的催化作用

點擊次數:153 發布時間:2018-12-25

 ELISA試劑盒技術原理:以免疫學反響為根底,將抗原、抗體的特異性反響與酶對底

1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號。
2. 結合在固相載體外表的抗原或抗體仍堅持其免疫學活性。
3. 酶符號的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
4. 受檢標本與固相載體外表的抗原或抗體起反響。再參加酶符號 的抗原或抗體,也經過反響而結合在固相載體上。
5. 此刻固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈必定的份額。
6. 參加酶反響的底物后,底物被酶催化變成有色產品,產品的量 與標本中受檢物質的量直接有關,故可根據呈色的深淺進行定 性或定量分析。測定辦法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),而且重復性好。
 ELISA試劑盒樣本處理及請求:

1. 血清:室溫血液天然凝固10-20分鐘,離心20分鐘擺布(2000-3000轉/分)。細心搜集上清,保留過程中如呈現沉積,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的請求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘擺布(2000-3000轉/分)。細心搜集上清,保留過程中如有沉積構成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管搜集,離心20分鐘擺布(2000-3000轉/分)。細心搜集上清,保留過程中如有沉積構成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢查排泄性的成份時,用無菌管搜集。離心20分鐘擺布(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。檢查細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度到達100萬/ml擺布。經過重復凍融,以使細胞損壞并放出細胞內成份。離心20分鐘擺布(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構成,應再次離心。
5. 安排標本:切開標本后,稱取分量。參加必定量的PBS,PH7.4。用液氮敏捷冷凍保留備用。標本消融后依然堅持2-8℃的溫度。參加必定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充沛。離心20分鐘擺布(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。分裝后一份待檢查,其他冷凍備用。
6. 標本收集后盡早進行獲取,獲取按有關文獻進行, ELISA試劑盒獲取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行實驗,可將標本放于-20℃保留,但應防止重復凍融。
 

 
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