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上海紀寧實業有限公司 >>> 技術文獻

ELISA實驗中常見問題及解決方法

點擊次數:135 發布時間:2018-12-18

ELISA實驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。選擇試劑時,應選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。 

ELISA實驗中加樣可能碰到的問題: 

 1、過長(特別是室內溫度較高時)

2、手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間 

3、加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外,血清或血漿標本分離不好即進行加樣 

相應解決辦法: 

1、標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。 

2、加樣后及時放入孵箱。 

3、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 

4、如果采用AT或其他全自動加樣,請選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 

5、標本較多時,請分批操作。 

ELISA試劑盒在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。 

 
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