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上海紀寧實業有限公司 >>> 技術文獻

部分ELISA試劑盒樣本的檢測方法

點擊次數:121 發布時間:2018-12-04

ELISA試劑盒通常我們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細胞培育上清或安排勻漿液等,不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準確性的*步。
1、血漿
ELISA試劑盒用含抗凝劑的采血管或離心管收集血液標本,標本收集后30min內4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,防止重復凍融。防止運用溶血或高血脂的標本。常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等,檢測時還應仔細閱讀試劑盒說明書,查看試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。
2、細胞培育上清
取細胞培育上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質,取上清,-20℃或-80℃保存,防止重復凍融。
3、細胞裂解液
1)吸去培育板內的培育基,用胰酶消化細胞,加適量培育基將細胞從培育板上吹下來。懸浮細胞可省略。
2)收集細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培育基,用預冷的PBS潤洗3次。
3)參加適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前參加蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需求150~250μL PBS重懸。
4)將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫凍結樣品,重復凍融幾次,使細胞充沛裂解。也可將樣品進行超聲破碎,以達到裂解的意圖。
5)4℃ 10000×g 離心10min,除去細胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,防止重復凍融。

 

 
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